VIEW ARTICLE doi:10.1094/ASBCJ-2008-0909-01
A More Cost- and Labor-Efficient Assay for the Combined Measurement of the Diastatic Power Enzymes beta-Amylase, alpha-Amylase, and Limit Dextrinase (1). D. Evan Evans (2), TIAR, University of Tasmania, Hobart, TAS, Australia. (1) This work was presented at the World Brewing Congress 2008, Honolulu, HI. (2) Corresponding author. TIAR, University of Tasmania, Private Bag 54, Hobart, TAS 7001, Australia. E-mail: <eevans@utas.edu.au>; Phone: +61-(0)3-6226-2638; Fax: +61-(0)3-6226-2642. J. Am. Soc. Brew. Chem. 66(4):215-222, 2008.
An improved, combined extraction protocol in an 8 × 12 microwell format has been devised that satisfactorily estimates the levels of beta-amylase, alpha-amylase, and limit dextrinase in malt. The improved protocol enables one person to undertake the assessment of 46 samples and 1 control in duplicate for each of the Ceralpha, Betamyl, and Limit DextriZyme assays, which require 5.5 hr of labor over 2 days, including an overnight extraction. The scaling down of the method resulted in the use of between one-quarter and one-fifth of the amount of substrate per assay recommended by the manufacturer, providing substantial cost savings. The increased labor and cost efficiencies described in this paper will increase the potential for diastatic power enzyme analyses to be undertaken as routine assays by malting quality evaluation laboratories, including breeding programs, maltsters, and grain traders. Keywords: alpha-Amylase, beta-Amylase, Diastatic power enzyme assay, Limit dextrinase
Una mejorada, combinada protocolo de extracción en un 8 × 12 microplaca de
formato se ha diseñado que satisfactoriamente estima los niveles de
beta-amilasa, alfa-amilasa, y dextrinasa límite en malta. El protocolo
mejorado permite una persona a llevar a cabo la evaluación de 46 muestras
de control y 1 en doble ejemplar para cada uno de los ensayos de Ceralpha,
Betamyl, y Limit DextriZyme, que requieren 5.5 hr de mano de obra más de 2
días, incluyendo una extracción en la noche. La reducción del método
resultó en el uso de entre un cuarto y un quinto de la cantidad de
sustrato por cada ensayo recomendado por el fabricante, proporcionando
sustanciales ahorros de costes. El aumentado de trabajo y la eficacia de
coste descrita en este papel aumentará el potencial para análisis de
enzima de poder diastástico para ser emprendidos como ensayes rutinarios
en los laboratorios para la evaluación de la calidad de maltera, incluidos
los programas de cultivo, malteadors, y los comerciantes de grano.
Palabras claves: alfa-Amilasa, beta-Amilasa, Dextrinasa límite, Ensayo de
las enzimas de poder diastástico