Determination of Ochratoxin A in Beer by Immunoaffinity Cleanup and Liquid Chromatography with Tandem Mass Spectrometry. M. Omote (1), Y. Kitagawa, and N. Mochizuki, Analytical Technology Laboratory, Asahi Breweries Ltd., Moriya-shi, Ibaraki, Japan. (1) Corresponding author. E-mail: <masayuki.omote@asahibeer.co.jp>; Phone: +81-297-46-1827; Fax: +81-297-46-1506. J. Am. Soc. Brew. Chem. 66(2):59-62, 2008.

A simple and sensitive method for the analysis of ochratoxin A in commercial beer products was developed using an immunoaffinity column for clean up and liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). Beer was degassed, diluted with a polyethylene glycol/sodium hy­drogen carbonate solution, and applied to an immunoaffinity column. Ochra­toxin A was eluted from the immunoaffinity column with methanol/acetic acid (98:2, vol/vol) and quantified by LC/MS/MS. The LC separation was performed with an octadecylated silica column (particles were 3.5 µm and 100 mm long and had a 2.1 mm i.d.), with a flow rate of 0.2 mL/min and a mobile phase consisting of water and acetonitrile, including 0.1% formic acid. MS/MS was used in multiple-reaction monitoring employing electrospray ionization (ESI-MRM). The recovery of ochratoxin A was 90.8–94.2% from beer spiked at 0.02 ng/mL. When the method was applied to the analysis of 33 domestic beer products, the ochratoxin A content ranged from 0.0026 to 0.049 ng/mL. Keywords: Beer, LC/MS/MS, Mycotoxin, Ochratoxin A

Un método simple y sensible para el análisis de ocratoxina A en las cervezas comerciales ha sido desarrollado utilizando una columna de inmunoafinidad para limpieza y cromatografía líquida con espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS). Cerveza fue desgasificado, diluido con una solución de polietileno glicol/carbonato ácido de sodio, y aplicado a una columna de inmunoafinidad. La ocratoxina A se fue eluida de la columna de inmunoafinidad con metanol y ácido acético (98:2, vol/vol) y cuantificados por LC/MS/MS. El separación de LC se realizó con una columna de sílice octadecilatada (las partículas eran 3.5 µm y 100 mm de largo y tenía un 2.1 mm i.d.), con un caudal de 0.2 mL/min y utilizando una fase móvil que consiste en agua y acetonitrilo, incluidos 0.1% fórmico ácido. MS/MS se utilizó en múltiples reacción de vigilancia que emplea ionización electroroció (ESI-GRM). La recuperación de la ocratoxina A fue 90.8–94.2% de la cerveza enriquecido con 0.02 ng/mL. Cuando el método se aplicó al análisis de 33 productos de la cerveza nacional, el contenido de ocratoxina A varió de 0.0026 a 0.049 ng/mL. Palabras claves: Cerveza, LC/MS/MS, Micotoxinas, Ocratoxina A