Novel Preliminary Washing Procedure for Industrial Yeast Samples, Used to Hasten the Differentiation of Closely Related Lager Strains Using Polymerase Chain Reaction. Mary Pecar (1), BrewTech Carlton and United Breweries Limited, 1 Bouverie Street, Carlton Melbourne, Victoria, Australia 3053; Kathryn Tonissen, School of Biomolecular and Biomedical Sciences, Faculty of Science, Griffith University, Nathan, Queensland, Australia 4111; and Peter Rogers (1), BrewTech Carlton and United Breweries Limited, Carlton Melbourne, Australia. (1) Corresponding authors. Fax: (61 3) 9347 9240. J. Am. Soc. Brew. Chem. 57(3):94-98, 1999. Accepted April 26, 1999.

A rapid yeast cell-washing procedure was developed using a solution mix of 10 mM ethylene diamine tetra-acetic acid and 0.2% (w/v) sodium tri-poly phosphate (EDTA/STPP solution). This solution removed inhibitors of the polymerase chain reaction (PCR) that are usually present in complex yeast broths used for beer production. This enables PCR to be performed on DNA isolated from yeast cells growing in wort fermentation broths without an additional overnight incubation step in yeast extract, peptone, and dextrose media. This washing procedure was found to be superior to other previously described methods. Parameters of PCR were further manipulated to be able to differentiate between closely related yeast lager strains. Keywords: Ale, PCR, Strain differentiation, Wort.

Se ha desarrollado un procedimiento rápido de lavado de células de levadura utilizando una disolución de EDTA/STPP que elimina los inhibidores de la reacción de PCR que se encuentran normalmente presentes en los complejos caldos en los que se cultiva la levadura para la producción de cerveza. Este procedimiento permite que las reacciones de PCR se lleven a cabo con ADN purificado a partir de células de levadura creciendo en el mosto durante la fermentación, sin la necesidad de tener que recurrir a una etapa adicional de incubación en medio YPD durante una noche. Hemos encontrado que este procedimiento de lavado es mejor que otros métodos previamente descritos. Además, hemos alterado los parámetros de la reacción de PCR para poder diferenciar entre cepas de levadura de fermentación baja estrechamente relacionadas entre sí.